薄層色譜是一種微量分析的分離過程，是一種簡便、快速、微量的層析方法。它將樣品點在以玻璃板或鋁、塑料等片材為載體的多孔吸附劑薄層的固定相上,利用流動相在特定的展開室中將混合物中的組份推移到不同距離處，在色譜展開整個過程中，樣品的成份受到正反不同的力的作用。
(1). 流動相利用毛細管力帶著樣品穿過固定相。
(2). 樣品與固定相的相互作用是指組份在移行過程中由于偶極-（誘導）-偶極相互作用，氫鍵和范德華力的作用而產生不同程度的延緩、吸附、分散、離子交換和絡合等分離機理。
由于樣品組份與流動相和固定相之間的相互作用力程度不同，整個毛細管流動過程中分離運動都在進行。基于這點，TLC系統（流動相和固定相）必須與樣品很好地匹配。
用顯色試劑處理，許多組份可在日光或紫外燈光下檢視。色譜可用肉眼或使用光密度計和照相機記錄或影像系統方法來評價。
一、薄層板
1.手工自制板 (1). 玻璃板的要求
用于制備薄層板的玻璃板要求表面光潔、平整，**好使用厚薄 1~2mm 的優質平板玻璃，普通窗玻璃一般不宜用于制作薄層板，玻璃板需洗凈**不掛水，晾干，貯存于干燥潔凈處備用。玻璃板反復使用時，應注意經常用洗液及堿液清洗，保持玻璃板面的光潔是保證薄層板質量的**基本要求。
(2). 制作方法
除另有規定外，將1份吸附劑加適量的水（如1份硅膠G一般加3份水）,在研缽中用研杵沿一個方向小心研磨**成均勻的有適當粘稠度的膠漿,立即傾入涂布器中,均勻地向前推進涂布在玻璃板上;或按照不同涂布器的規定操作涂布;涂布好的薄層板于室溫下在水平臺上晾干,再在規定的溫度(一般為105℃~110℃)下烘約30分鐘活化,貯于干燥器中備用。薄層板的厚度一般為 0.25~0.5mm.。
2. 商品化供應的預制板和高效板 (1).板的尺寸
的干燥器中）。
3. 薄層板的保存
使用的硅膠，不用時一定要密封，防止吸潮。TLC所用的硅膠板一定要保存在干燥器里面，或使用前在紅外烘箱里干燥一段時間。
二、展開劑的選擇
選擇展開劑一般要用混合溶劑：一般要有一種對所要展開樣品溶解度較大的溶劑，視樣品的極性，再選用相應的體系 極性小的用乙酸乙酯：石油醚系統 極性較大的用甲醇：氯仿系統
極性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系統 拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
選擇適當的展開劑是shou要任務.一般常用溶劑按照極性從小到大的順序排列大概為：石油迷<己烷<四氯化碳<苯<二氯甲烷<氯仿<乙醚<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<甲醇（乙醇）<水。展開劑的比例要靠嘗試.一般根據文獻中報道的該類化合物用什么樣的展開劑，就shou先嘗試使用該類展開劑，然后不斷嘗試比例，直到找到一個分離效果好的展開劑。很多時候,展開劑的選擇要靠自己不斷變換展開劑的組成來達到**佳效果。展開劑的選擇條件：①對的所需成分有良好的溶解性；②可使成分間分開；③待測組分的Rf在0.2~0.8之間，定量測定在0.3～0.5之間；④不與待測組分或吸附劑發生化學反應；⑤沸點適中，黏度較小；⑥展開后組分斑點圓且集中；⑦混合溶劑**好用新鮮配制。
一般把兩種溶劑混合時,采用高極性/低極性的體積比為1/3的混合溶劑,如果有分.
開的跡象,再調整比例,達到**佳效果，如果沒有分開的跡象，**好是換溶劑。
三、點樣
1. 小技巧：就是在點樣時食指放在點樣管的上端，當點樣管的下端與硅膠板接觸的瞬間輕輕松動上端的食指，溶液自然從點樣管出來，迅速提起點樣管，就這樣反復操作點出的斑點既小又均勻。
2. 點不能點得太濃，否則容易重疊，不易判斷，因為如果兩個點相近的話，一濃就變成一個點了。而且濃度太大的話，點下的樣品不能被硅膠很好的吸收，不利于分離。
3. 板上點的展開的清晰程度和溶劑的極性和物質在該溶劑中的溶解性有關，只有兩者比較合適才能有一個交好的分離效果。
4. 某種樣品在這種展開劑中只顯示一個點，并不等于在別的展開劑中也只顯示一個點。因此在尋找展開劑時，多嘗試幾種比例不同，成分不同的展開劑。展開劑的極性太小，點分不開，極性太大，也分不開.一般以目標產物的Rf值在0.3左右為**佳
5. 針尖不要刺破已經鋪好的薄層板。點樣的時候手不能抖動，動作要輕，這些要*在于意會，逐漸鍛煉，相信你會體會到其中的快感。
